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質(zhì)量光度計的優(yōu)點分析

點擊次數(shù):325 更新時間:2025-06-05
質(zhì)量光度計(MassPhotometer)是一種用于單分子定量分析的儀器,主要通過測量生物大分子溶液中分子的質(zhì)量來實現(xiàn)對樣品的分析。以下從技術(shù)原理和實際應(yīng)用角度,分析其核心優(yōu)點:
 
一、無需標記與固定,保留分子天然狀態(tài)
 
避免人為干擾:傳統(tǒng)單分子檢測技術(shù)(如熒光顯微鏡)需對分子進行熒光標記或固定在基底上,可能改變分子構(gòu)象、活性或相互作用。
 
質(zhì)量光度計通過光學反射原理直接測量溶液中分子的質(zhì)量,無需任何化學修飾,確保分子處于天然溶液環(huán)境,數(shù)據(jù)更真實反映生理狀態(tài)。
 
適用范圍廣:可檢測蛋白質(zhì)、核酸、病毒顆粒、納米顆粒等多種生物大分子,尤其適合結(jié)構(gòu)動態(tài)變化敏感的樣品(如膜蛋白、蛋白復合物)。
 
二、單分子定量,高精度測量絕對質(zhì)量
 
絕對質(zhì)量測定:直接給出單個分子的絕對質(zhì)量(單位:kDa),而非相對信號強度。例如,可區(qū)分同源蛋白的不同亞型(如100kDa與105kDa的差異),或檢測翻譯后修飾(如磷酸化、糖基化)引起的質(zhì)量變化。
 
單分子統(tǒng)計分析:通過統(tǒng)計大量單分子數(shù)據(jù)(通常檢測數(shù)萬至數(shù)百萬個分子),提供質(zhì)量分布直方圖和群體異質(zhì)性分析,可識別樣品中的雜質(zhì)、聚集體或構(gòu)象異質(zhì)性。
 
例:在抗體藥物分析中,可區(qū)分單體、二聚體與降解片段的比例。
 
三、操作簡便,快速獲取結(jié)果
 
無需復雜樣品制備:僅需將樣品稀釋至合適濃度(通常為nM至μM級),即可直接上樣檢測,避免傳統(tǒng)方法(如超速離心、凝膠電泳)的繁瑣流程。
 
實時動態(tài)監(jiān)測:支持時間分辨測量,可追蹤分子組裝/解聚過程(如病毒衣殼組裝、淀粉樣纖維形成)或酶促反應(yīng)中的質(zhì)量變化,實時生成動力學曲線。
 
高通量篩選:部分型號支持多孔板(如96孔板)自動檢測,適合藥物篩選、蛋白穩(wěn)定性優(yōu)化等需要大量樣品對比的場景。
 
四、多場景適用性與兼容性
 
溶液環(huán)境兼容性:可在生理緩沖液、細胞膜模擬環(huán)境(如脂質(zhì)體)、甚至細胞裂解液中直接檢測,貼近真實生物環(huán)境。
 
與其他技術(shù)聯(lián)用:可與色譜(如SEC-MP,尺寸排阻色譜-質(zhì)量光度法聯(lián)用)結(jié)合,分離后實時檢測各組分的質(zhì)量,提升復雜樣品的分析能力。
 
跨學科應(yīng)用:不僅限于生物學,還可用于材料科學(如納米顆粒粒徑分析)、食品科學(如乳蛋白聚集體檢測)等領(lǐng)域。
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